与较成熟的公牛相比，年轻公牛每次射精通常产生较少量的精液，精子浓度较低，并且通常无法使用标准收集频率计划满足精液需求。本研究的目的是评估采精频率对商业条件下年轻公牛精液输出、精子质量和田间生育力的影响。年龄为 366 ± 8 天（平均值 ± SEM）的荷斯坦弗里西亚公牛被分配以下两种射精收集频率之一：（i）HF（n = 14 头公牛），其中每天收集两次射精，每两周 5 天或(ii) LF（n = 12 头公牛），每周两天收集一次精液。试验期一直持续到每头公牛达到 20 个射精和 1000 个可销售的冷冻精液吸管。在冷冻前和解冻后（在 0 和 2 小时）评估所有射精的主观动力。一部分精液在解冻后通过计算机辅助精子分析来评估运动性、运动学和形态学缺陷，并通过流式细胞术评估活力、膜流动性、顶体完整性、活性氧和 DNA 片段化。总共对奶牛和小母牛进行了 13,846 次授精（HF 9,541 次，LF 4,305 次）。在射精次数相同的情况下，HF 比 LF 提前 41 天达到 1000 吸管阈值（P < 0.01）。射精量和精子浓度不受治疗影响，但当天的第一次射精（仅 HF）比第二次射精具有更大的体积（P < 0.001）和精子浓度（P < 0.05）。HF 具有较高的预冷冻总量 (P < 0.01) 和总量 (P < 0. 05) 运动性不如LF。HF 比 LF 具有更高的解冻后（2 小时）总运动和总运动（P < 0.05）。射精排斥率在治疗之间没有差异。治疗、周数或当天射精次数（仅限 HF）对解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化没有影响。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。HF 比 LF 具有更高的解冻后（2 小时）总运动和总运动（P < 0.05）。射精排斥率在治疗之间没有差异。治疗、周数或当天射精次数（仅限 HF）对解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化没有影响。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。HF 比 LF 具有更高的解冻后（2 小时）总运动和总运动（P < 0.05）。射精排斥率在治疗之间没有差异。治疗、周数或当天射精次数（仅限 HF）对解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化没有影响。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。射精排斥率在治疗之间没有差异。治疗、周数或当天射精次数（仅限 HF）对解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化没有影响。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。射精排斥率在治疗之间没有差异。治疗、周数或当天射精次数（仅限 HF）对解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化没有影响。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。周或当天的射精次数（仅限 HF）关于解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。周或当天的射精次数（仅限 HF）关于解冻后的运动和运动学参数或精子活力、膜流动性、顶体完整性和 DNA 片段化。然而，HF 的超氧化物产量低于 LF (P < 0.05)。HF 和 LF 公牛每次人工授精的妊娠率分别为 64.5 ± 1.0% 和 59.9 ± 1.1%（平均值 ± SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。分别（平均值±SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。分别（平均值±SEM；P = 0.05）。总之，更频繁地收集年轻公牛的精液显着减少了获得 1000 根吸管所需的天数，提高了精液质量，降低了超氧化物产量并提高了田间肥力。
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Increasing the frequency of ejaculate collection in young dairy bulls increases semen production and field fertility
Younger bulls typically produce lower volumes of semen per ejaculate with a lower sperm concentration than older more mature, bulls and often fail to meet semen demand using standard collection frequency schedules. The objective of this study was to assess the effect of ejaculate collection frequency on semen output, sperm quality and field fertility in young bulls under commercial conditions. Holstein Friesian bulls aged 366 ± 8 days (mean ± SEM) were assigned one of two ejaculate collection frequencies: (i) HF (n = 14 bulls), where ejaculates were collected twice a day, five days in each two-week period or (ii) LF (n = 12 bulls), where ejaculates were collected once a day, two days per week. The trial period continued until each bull reached both 20 ejaculates and 1000 marketable frozen semen straws. Subjective motility was assessed on all ejaculates pre-freeze and post-thaw (at 0 and 2 h). A subset of ejaculates were assessed post-thaw by computer-assisted sperm analysis for motility, kinematics and morphological defects and by flow cytometry for viability, membrane fluidity, acrosome integrity, reactive oxygen species and DNA fragmentation. A total of 13,846 inseminations (9,541 for HF and 4,305 for LF) were carried out on dairy cows and heifers. HF reached the 1000 straw threshold 41 days earlier than LF (P < 0.01) with the same number of ejaculates. Ejaculate volume and sperm concentration were not affected by treatment but the first ejaculate of the day (HF only) had a greater volume (P < 0.001) and sperm concentration (P < 0.05) than the second ejaculate. HF had higher pre-freeze total (P < 0.01) and gross (P < 0.05) motility than LF. HF had higher post-thaw (2 h) total and gross motility than LF (P < 0.05). Ejaculate rejection rates did not differ between treatments. There was no effect of treatment, week or ejaculate number of the day (HF only) on post-thaw motility and kinematic parameters or sperm viability, membrane fluidity, acrosome integrity and DNA fragmentation. However, HF had lower superoxide production than LF (P < 0.05). Pregnancy per artificial insemination was 64.5 ± 1.0% and 59.9 ± 1.1% for the HF and LF bulls, respectively (mean ± SEM; P = 0.05). In conclusion, collecting ejaculates more frequently from young bulls significantly reduced the number of days required to obtain 1000 straws, increased semen quality in terms of lower superoxide production and increased field fertility.